На стр. 78 мы в общих чертах описали В-клеточный путь дифференциров» ки. Вполне возможно, что в этом ряду дифференцирующихся форм наиболее важное значение имеют сами В-клетки. Как стало ясно в последнее время, не-зрелые и зрелые В-клетки характеризуются значительной гетерогенностью. Любые гипотезы о механизмах активации и функционировании В-клеток должны учитывать эту гетерогенность.

Изменение поверхностных иммуноглобулинов В-клеток при дифференцировке

В-клетки отличаются от других лимфоидных клеток наличием на поверх^ ности иммуноглобулинов (nig), что позволяет осуществляться клональному отбору под действием антигена. Поскольку nig необходимы для функционировав ния В-клеток как при отборе В-клеточных клонов, так и при их активации, исследование изменений nig в ходе дифференцировки В-клеток представляет значительный интерес. В первых исследованиях для определения изотипа nigповерхностные компоненты В-клеток новорожденных мышей метили радиоак-тивным иодом в реакции, катализируемой лактопероксидазои, затем выделяли nig методом иммунопреципитации и подвергали электрофорезу в полиакрила-мидном геле в присутствии додецилсульфата натрия [45]. Этот метод позволяет различать тяжелые цепи мышиных Ig изотипов х и 8 по разнице в их молеку-лярных массах. С помощью этого метода было установлено, что на 8—12-й неделе жизни б-цепи начинают доминировать над ц-цепями.
Проточный микрофлуориметрический анализ (см. гл. 29) показал, что В-клетки молодых мышей более гетерогенны и содержат больше nlgM, чем В-клет^ ки взрослых животных (рис. 3.7) [46]. Относительно большое количество nlgM на В-клетках из селезенки новорожденных мышей свидетельствует о том, что IgM накапливается в мембране образующихся В-клеток крайне быстро: у непо¬средственных предшественников В-клеток nlgM очень мало. В ходе развития среднее количество IgM на В-клетках селезенки уменьшается по мере того, как появляются клетки, экспрессирующие IgD (рис. 3.8). В возрасте 8—12 недель доля ^М+-клеток лишь немного превышает долю IgD+-KfleTOK [46, 47] (рис. 3.8). Хотя преобладающая часть В-клеток у взрослых мышей экспрессирует одно¬временно как IgM, так и IgD, могут быть выделены две группы В-клеток: клетки с небольшим количеством nlgD и различным содержанием nlgM и клетки с ма¬лым или средним количеством nlgM и средним или большим количеством nlgD.

Анализ развития В-клеток показывает, что nIgM3+-, nlgD "-клетки посте-пенно превращаются в nIgM3+-, nIgD+-, а затем в nIgM+-, п^03+-клетки. При активации покоящихся В-клеток и их дифференцировке в плазматические клет-ки экспрессия IgD прекращается раньше, чем экспрессия IgM. В результате большие активированные В-клетки и большинство В-клеток памяти не экспрес-сируют IgD [48, 49]. В гл. 10 и 19 описан характер экспрессии IgM и IgD в клет¬ках, которые позднее образуют иммуноглобулины других классов.