Каждая пара цепей Н — LB молекуле иммуноглобулина образует анти-генсвязывающий центр. Связывание антигена такими центрами основано на нековалентных взаимодействиях и может быть понято в рамках представлений о равновесных термодинамических процессах (рис. 1.6). Константу равновесия (аффинность, сродство) при взаимодействии между простым моновалентным антигеном и антителами можно измерить несколькими разными способами. Антигенсвязывающие центры данной молекулы могут связать несколько разных антигенов. Как правило, такие антигены обладают структурным сходством и носят название перекрестнореагирующих. Иногда оказывается, что гомогенная популяция молекул антител (например, продуцируемых гибридомой или мие-ломой) способна связывать различные молекулы с очень малым структурным сходством или вовсе несхожие. В этом случае говорят о мультиспецифическом связывании, которое объясняют образованием связей в различных участках внутри антигенсвязывающего центра (субсайтах).

Биологические последствия связывания антигена, такие, как активация системы комплемента или освобождение медиаторов анафилаксии, по-видимому, обусловлены главным образом перекрестным связыванием иммуноглобулино-вых молекул при их взаимодействии с мультивалентными антигенами. Пока неясно, приводит ли связывание антигена к существенным аллостерическим изменениям в молекуле иммуноглобулина, которые ведут к проявлению биоло¬гических функций.

В большинстве случаев популяции антител, появляющиеся в сыворотке иммунизированных животных, представляют собой гетерогенный набор молекул с разными антигенсвязывающими центрами и с различной аффинностью к анти-гену. Это относится даже к антителам, специфическим для отдельной антигенной детерминанты или эпитопа. В связи с этим определение аффинности такой попу-ляции молекул дает усредненную оценку. Как правило, приводят среднюю характеристическую константу ассоциации (К0) для связывания антителами моновалентного антигена в условиях, когда занята половина антигенсвязываю-щих центров. ющая клетка вырабатывает гомогенную популяцию молекул. Часто отмечают, что с увеличением срока после иммунизации происходит повышение средней аффинности антител (рис. 1.6). Это «созревание иммунного ответа» отражает отбор клеток, образующих более аффинные антитела, и, вероятно, несет опре¬деленный биологический смысл, так как позволяет очень малому количеству антител более эффективно реагировать с антигеном и создавать защиту при введении микроорганизмов в организм, который уже встречался ранее с данным возбудителем.

Тот факт, что отдельная антителообразующая клетка продуцирует антитела лишь одной специфичности, позволил создать метод, обеспечивающий получе¬ние практически неограниченного количества гомогенных, или моноклональных антител (гл. 28). Слияние активированных В-клеток с клетками плазмоцитомы приводит к возникновению гибридов соматических клеток (гибридом). Гибридо-ма растет в культуре ткани подобно родительской злокачественной плазмоцитоме и секретирует большое количество иммуноглобулина, специфичность которого определяется генами нормальной В-клетки, участвовавшей в слиянии. В настоя¬щее время для слияния используют такие плазмоцитомы, которые утратили свои иммуноглобулиновые гены. Соответственно возникающие гибриды проду-

цируют только иммуноглобулин нормальной В-клетки. Получаемые этим мето¬дом антитела имеют неоценимое значение для обнаружения антигенов {гл. 17 и 29), для очистки белков, а также в качестве диагностических и терапевти¬ческих средств.

Гетерогенность популяции антител по аффинности и специфичности отра-жает гетерогенность клеток, секретирующих антитела. Каждая антителообразу-