Различия в положении дисульфидных связей между классами тяжелых цепей заключаются в неодинаковой локализации мостика между тяжелыми и легкими цепями, наличии и расположении добавочных внутрицепьевых и внутрисубъединичных мостиков, а также в числе и локализации связей между тяжелыми цепями в шарнирной области. На рис. 7.19 дана схема всех этих связей. Следует, однако, заметить, что локализация некоторых из них точно еще не доказана.

Способность дисульфидных связей к восстановлению также неодинакова. Она зависит от конформации восстанавливаемой молекулы и доступности ди-сульфидных связей для восстановления. Легче всего, как правило, разрываются связи между субъединицами (мономерами). Для этого можно использовать сла-бые восстановители, например цистеин или 2-меркаптоэтаноламин, хотя могут применяться также и низкие концентрации 2-меркаптоэтанола или дитиотреи-тола. Для разрыва межцепьевых связей необходимо брать более сильные восста¬новители, такие, как 2-меркаптоэтанол или дитиотреитол. Труднее всего рас¬щепляются внутрицепьевые связи; для этого требуется сильный восстановитель в присутствии высоких концентраций денатурирующих веществ (например, в 5 М растворе гуанидина или мочевины).

Различия между дисульфидными связями заключаются также в степени их вариабельности. Внутрицепьевые связи, формирующие структуру доменов, эволюционно консервативны; они имеются в доменах всех классов иммуногло-булинов. Следующий малоизменчивый тип связи — это мостик, соединяющий тяжелые и легкие цепи в сегменте между VH И Сн 1. Только vl"4enH и <х2А2ш (1)-цепи ее не имеют. У а2-цепи с аллотипом А2т (1) связь Н—L совсем отсут-ствует, а вместо этого легкие цепи связаны не с тяжелыми цепями, а друг с дру-гом. У IgGl легкая цепь присоединена к остатку 220 у!-цепей между Сн1 и

СН2. Как уже говорилось, согласно трехмерным моделям IgCl, остаток 220 находится в достаточной близости к остатку, участвующему в белках других классов и подклассов в образовании дисульфидной связи, что позволяет ему также образовывать дисульфидный мостик с легкой цепью, не нарушая укладку полипептидной цепи.Связи между тяжелыми цепями варьируют в большей степени. Всего может быть от одной до пятнадцати дисульфидных связей между двумя тяжелыми цепями у одной молекулы иммуноглобулина. Молекулы IgE несколько необыч-ны в этом отношении, поскольку у них две дисульфидные связи разделены СЕ2-доменом.

Дисульфидные связи между субъединицами и J-цепью имеются лишь у полимерных иммуноглобулинов (IgA и IgM). Очень важную роль для процес¬са сборки мономеров в полимерные молекулы играет остаток Gys-575.

Наконец, следует упомянуть о некоторых необычных дисульфидных свя¬зях: одной в IgE и двух в IgA. Положение добавочных внутрицепьевых дисуль-

фидных связей в IgA гомологично остаткам IgCl, которые закрыты углеводным компонентом лишь у yl-цепей, но не у а-цепей. Эти добавочные дисульфидные связи на поверхности молекулы могут образовывать очень напряженную кон-формацию, которая обусловливает функциональные различия между гамма-и альфа-цепями, например различия в способности связывать комплемент.