С помощью антиидиотипических антител можно следить за наследованием генетических маркеров вариабельных областей иммуноглобулинов, картировать гены вариабельных областей и изучать регуляцию экспрессии генов V. Идио¬типы были первыми маркерами, позволившими установить связь между генами вариабельных и константных областей. Большинство описанных идиотипиче-ских детерминант обнаруживается лишь у ограниченного числа линий живот¬ных. При скрещивании особей линий, иммуноглобулины которых различаются двумя генетическими маркерами, например идиотипом и аллотипом, иногда удается наблюдать рекомбинации между указанными маркерами (у потомства при скрещивании гибридов Гх с родительской линией). Прослеживая у таких животных экспрессию других генетических маркеров иммуноглобулинов и изме-ряя частоту рекомбинаций между любыми двумя маркерами, можно построить генетическую карту.

Несомненно, для такого подхода необходимо, чтобы антиидиотипические антитела были специфическими лишь к одному ...

Одним из основных нерешенных вопросов иммунологии является природа Т-клеточного рецептора. Десятилетнее изучение его так и не дало ясного отве¬та, используют ли Т- и В-клетки для построения антиген-специфических моле¬кул одни и те же или разные гены. Даже клонированные антиген-специфиче¬ские Т-клетки синтезируют лишь незначительные количества антиген-специфи¬ческих факторов, что затрудняет прямое химическое сравнение этих факторов с антителами. Поэтому широкое применение нашел анализ идиотипов: резуль¬таты его кажутся очевидными, однако интерпретировать их надо с известной осторожностью. Рядом исследователей было показано, что Т-клеточные факто¬ры и антитела имеют общие идиотипические детерминанты. Наиболее четко это следует из результатов изучения идиотипов мышиных антител к НФ [46] и ГАТ — сополимеру глутаминовой кислоты, аланина и тирозина [47]. Косвен¬ные данные были получены также для идиотипов Т15 и А5А при изучении сти¬муляции и ингибирования антиидиотипическими антителами функ ...

Гетерогенность антител, вырабатывающихся у мышей BALB/c в ответ на введение а(1 —>¦ 3)-декстрана, также относительно невелика. Все они, как показали Бломберг и др. [38], имеют легкую цепь Я-типа и общие идиотипиче-ские детерминанты с декстрансвязывающим миеломным иммуноглобулином J558. Эти исследования были продолжены другими авторами; выяснилось, что антитела к декстрану представляют собой семейство белков, имеющих как общие, так и уникальные структурные черты. К трем разным миеломным анти-декстрановым белкам, J558, М104 и UPC102, были получены серии антиидиоти-пических антисывороток. Одна из антисывороток одинаково хорошо реагиро¬вала со всеми тремя белками; распознаваемую ею детерминанту(ы) назвали IdXr чтобы подчеркнуть ее общность для многих антител к декстрану (т. е. наличие перекрестных реакций). Кроме того, каждый белок имел индивидуальные детер-минанты, обозначенные как Idl (J558), Id I (М104) и Idl (U102); их можно было-обнаружить после адсорбци ...

У мышей аллотипические детерминанты обнаружены у всех классов тяжелых цепей, за ислючением IgG3. На легких цепях иммуноглобулинов мыши серологически детектируемые аллотипические детерминанты отсутствуют. Для Сх-области иммуноглобулинов крысы описаны два аллотипа.
Номенклатура аллотипов тяжелых цепей иммуноглобулинов мыши была разработана Херценбергами [1,4] еще до того, как были идентифицированы и классифицированы их Сн-изотипы. По этой номенклатуре номера, перво¬начально приписанные каждому аллотшшческому локусу, отличаются от номе¬ров, обозначающих Сн-изотипы. Например, локус Igh-1 принадлежит гену Су2а, локус Igh-4—гену Су1 и т. д. (табл. 9.1). В локусе Igh-1 имеется 12 аллелей: Igh-la, Igh-lb и т. д.; другими словами, существует 12 СТ2а-аллотипов мыши. Позднее Либерман [4] предложила номенклатуру, включающую наименование самого Сн-локуса. По этой номенклатуре аллотипы С72а-цепи обозначаются как IgG2aa, IgG2ab и т. д. Как и в случае Сн-аллотипов человека, рекомбина¬ци ...

Идиотипические детерминанты чрезвычайно удобны для быстрого и доста-точно точного сравнения вариабельных областей, однако лишь в последнее время удалось на немногих примерах охарактеризовать их на молекулярном уровне. Парадоксален тот факт, что очень легко получить антиидиотипы, но очень трудно подвергнуть их детальному изучению. Еще предстоит выяснить, не обнаружатся ли в результате изучения строения идиотипов общие черты, которые позволят дать понятию «идиотип» определение, более ясное, чем опре¬деление, используемое сейчас. Знание структуры отдельных детерминант и антиидиотипов по меньшей мере уменьшит неразбериху, всегда сопутствующую исследованиям, в которых для характеристики молекул со многими детерми-нантами применяются гетерогенные реагенты. Обращает на себя внимание тот факт, что у изученных на молекулярном уровне идиотипических детерминант существенно важными для активности оказались лишь единичные аминокисло¬ты. Однако ясно и то, что эти детерминанты являются конформационно ...

Многие аллотипы различаются заменой лишь одной или нескольких ами-нокислот, что можно легко объяснить мутациями, приводящими к образованию аллельных вариантов данного структурного гена. Такие аллотипы называют «простыми». Небольшим количеством замен они напоминают аллельные формы многих белков, например глобиновых цепей. Причина появления «комплекс¬ных» аллотипов более сложная. Значительные отличия — более чем на 30% аминокислотных остатков — наблюдаются у аллельных вариантов цепей (т. е. аллотипов) иммуноглобулинов кролика по локусам а и b (аллотипы VH и Сн)- Этим они напоминают изотипы иммуноглобулинов. Трудно объяснить столь значительные различия простой дивергенцией аллелей единственного структурного гена в процессе эволюции отдельного вида животных. Появление некоторых комплексных аллотипов легче понять, исходя из предположения о тандемной дупликации набора псевдоаллельных структурных генов; возможно, гены, кодирующие некоторые или даже все известные аллотипы, имеются у каждой осо ...

Локус с кодирует два аллотипа Х-цепей кролика с7 и с21. В некоторых опы-j тах было показано, что гены cl и с21 сегрегируют как аллели, однако описан случай, когда они наследовались вместе, как сцепленные гены, и экспрессировались у всего потомства [17]. У кроликов, гомозиготных по гену с7 или с21, были обнаружены «с-отрицательные» Х-цепи. У подобных цепей отсутствуют детерминанты с7 или с21 и соответствующие серологически обнаруживаемые j аллотипы. До настоящего времени не удалось с уверенностью локализовать 1 детерминанты с7 и с21 в УК- или С^-цепях. Таким образом, хотя организация локуса с еще не ясна, скорее всего, есть основания думать, что имеется нескол ь-vj ко структурных генов, кодирующих ^-цепи у кролика ...

При сравнении сывороточных антител с миеломными белками к одной и той же антигенной детерминанте часто обнаруживалось наличие у них общих идиотипов и сходство в специфичности связывания. Уже на ранних этапах. изучения сывороточных антител к описанным выше антигенам выяснилась относительная ограниченность репертуара В-клеток, а также тот факт, что структуры вариабельных областей антител и миеломных белков, имеющих общий идиотип, скорее всего, идентичны. Это предположение нашло подтвер¬ждение при определении N-концевых аминокислотных последовательностей поликлональных антител к декстрану и ФХ, которые оказались весьма похо¬жими на аминокислотные последовательности миеломных белков с тем же идиотипом. Однако более детальное исследование репертуара антител стало возможным лишь с появлением техники моноклональных антител. Это позво¬лило изучить структуру и идиотипы антител, секретируемых индивидуальными клонами гибридомных клеток, и выяснить молекулярные основы разнообразия антител.
...

Более широкий набор антител образуется к гаптену АФА. Конъюгаты это¬го заряженного гаптена с белками индуцируют у мышей образование гетеро¬генной популяции антител. В отличие от случая с ФХ и декстраном, не было найдено миеломных белков, которые могли бы служить простыми иммуногена-ми для получения антиидиотипических антисывороток и стандартами для сравне¬ния. Используя другой подход, Нисонов и др. [40] выделили с помощью изо-электрофокусирования (ИЭФ) из сыворотки A/J-мыши, иммунизированной АФА субпопуляцию антител к этому гаптену и получили к ней антиидиотипическую антисыворотку. Заслуживает внимания тот факт, что антиидиотипические антитела реагировали только с теми антителами к АФА, изоэлектрическая точка которых находилась в пределах р! иммуногена. Данный перекрестно-реагиру-ющий идиотип, обозначаемый CRI, экспрессируется у незначительного числа линий мышей с аллотипом Ighe и Ighd [40]. Однако наследование CRI зависит и от генов, контролирующих экспрессию х-цепей. Эти данные корр ...

Локус Ъ кодирует по меньшей мере 9 аллотипов х-цепей иммуноглобулинов кролика. Четыре из них, Ь4, Ь5, Ь6 и Ь9, встречающиеся, как правило, у лабо-раторных кроликов, хорошо изучены. Аллельные варианты определяются в константной (Сх) области х-цепи. Аллотипы, кодируемые локусом &, являются комплексными: при сравнении С^-областей любых двух из перечисленных выше аллотипов обнаруживается от 20 до 35% различий в аминокислотных остат¬ках [14]. Маловероятно, чтобы подобные значительные отличия возникли в ре-зультате простой аллельной дивергенции единственного структурного гена в процессе эволюции «кролика» (Oryctolagus cuniculus)В—некоторых случаях аллотипы локуса Ъ экспрессируются неожиданно, как латентные аллотипы у номинально гетерозиготных или гомозиготных кроликов. Как и в случае а-аллотипов, появление латентных аллотипов лучше всего объясняется наличием в геноме кодирующих их генов наряду с генами | номинальных аллотипов. Одна из возможностей состоит в том, что в обе ...