Рецепторы Fc (подробности см. в гл. 10) и антиген мышиных В-лимфоцитов (MBLA) обнаруживаются в эмбриональной печени практически на всех В-клет-ках с фенотипом Ig+ [53]. В то же время рецепторы комплемента (РК, CR) и минорные антигены, стимулирующие лимфоциты (Mis) экспрессируются не все-ми мышиными В-клетками. CR будут более подробно описаны в гл. 10 и 24. Клетки, несущие CR, обычно обнаруживают по их способности прикрепляться к эритроцитам, покрытым (сенсибилизированным) комплементсвязывающи-ми антителами и инкубированным затем с источником комплемента, что при¬водит к образованию комплекса эритроцит — антитело — комплемент (ЭАК) (54]. При инкубации клеток селезенки взрослой мыши с ЭАК большая часть В-клеток связывает эритроциты, образуя розетки. В то же время В-клетки се¬лезенки новорожденных мышей (в возрасте до 2 недель) и В-клетки из костного мозга мышей любого возраста не образуют розеток при инкубации с ЭАК. Сле¬довательно, CR характерны только для В-клеток на поздних стадия ...

На стр. 78 мы в общих чертах описали В-клеточный путь дифференциров» ки. Вполне возможно, что в этом ряду дифференцирующихся форм наиболее важное значение имеют сами В-клетки. Как стало ясно в последнее время, не-зрелые и зрелые В-клетки характеризуются значительной гетерогенностью. Любые гипотезы о механизмах активации и функционировании В-клеток должны учитывать эту гетерогенность.

Изменение поверхностных иммуноглобулинов В-клеток при дифференцировке

В-клетки отличаются от других лимфоидных клеток наличием на поверх^ ности иммуноглобулинов (nig), что позволяет осуществляться клональному отбору под действием антигена. Поскольку nig необходимы для функционировав ния В-клеток как при отборе В-клеточных клонов, так и при их активации, исследование изменений nig в ходе дифференцировки В-клеток представляет значительный интерес. В первых исследованиях для определения изотипа nigповерхностные компоненты В-клеток новорожденных мышей метили радиоак-тивным иодом в ...

У мышей линии GBA/N в Х-хромосоме имеется ген xid, который вызывает нарушение некоторых функций В-клеток [56]. У этих мышей лишь небольшая часть В-клеток селезенки экспрессирует nig, что связано с полным отсутствием описанной выше наиболее зрелой субпопуляции клеток с фенотипом nIgM+, nIgD2+, nla+, GR2+. При иммунизации самцов (CBA/N х BALB/c) Fx, у кото¬рых выражен дефект иммунитета, определяемый геном xid, клетками селезенки мышей одной из родительских линий BALB/c образуется антисыворотка, не реа¬гирующая с клетками селезенки нормальных новорожденных мышей или взрос¬лых хг<2-мышей, но реагирующая с 50% В-клеток из селезенки взрослых нор¬мальных животных и с 15—20% клеток 18-дневных мышей [57]. Антиген В-клеток, с которым реагирует эта антисыворотка, был назван Lyb 3.

Иммунопреципитация мембранных белков В-клеток, меченных радиоактив-ным иодом, анти-Lyb 3, показала, что антиген представляет собой полипептид с молекулярной массой 68 000 [58]. Если самцов (CBA/N х C57BL/ ...

В-клетки, как и все другие клетки крови, возникают из плюрипотентных стволовых кроветворных клеток [15]. Это было показано в опытах с использо-ванием генетических маркеров. Маркеры одновременно обнаруживались у всех клеток, развивающихся по дифференцировочным путям, показанным на рис. 3.2.

Клетку называют стволовой, если одна из возникающих в результате ее деления дочерних клеток дифференцируется, а другая остается недифференци-рованной и служит источником образования последующих поколений дифферен цированных клеток. Такое асимметричное деление характерно не только для плюрипотентных стволовых клеток. Клетки, сохранившие способность лишь к одному пути дифференцировки, также могут оставаться способными к само-обновлению. Например, стволовые клетки, из которых могут возникать клетки миелоидной дифференцировки, но не лимфоциты, были экспериментально выве-дены в самоподдерживающуюся линию. Можно предполагать, что предшествен-ники Т-клеток и предшественники В-клеток способны ...

Для понимания процесса дифференцировки В-клеток необходимо опреде-лить природу сигналов, получаемых В-клетками, выяснить механизмы влия¬ния этих сигналов на свойства В-клеток, а также механизмы активации или супрессии образования антител. Поскольку на иммунную систему большинства экспериментальных животных и человека постоянно воздействуют внешние анти¬гены, их В-клетки постоянно активируются под влиянием тех самых сигналов, которые мы бы хотели изучать.

Члены разных популяций В-клеток могут по-разному реагировать на эти сигналы. В результате общее состояние функций В-клеток оказывается доста-точно сложным и отражает результат активации разных типов В-клеток. Исполь¬зование aHTH-Lyb-антисывороток или моноклональных антител, специфичных к В-клеткам, фракционирование В-клеток по размеру или на основе других фи¬зических параметров в сочетании с использованием иммунодефицитных линий мышей делают возможным детальный анализ этих В-клеточных субпопуляций. В частности, поскольку ...

Программу дифференцировки В-клеток грубо можно разделить на две фазы: антигеннезависимую и антигензависимую. Первые этапы дифференци-ровки, приводящие к образованию nIg^B-лимфоцитов, характеризующихся клональным разнообразием, происходят, как и в случае миелоидной и эритро-идной дифференцировок, под влиянием локального окружения. У млекопитаю¬щих эта антигеннезависимая фаза включает стадию пре-В~клеток, в которой происходит перестройка генов иммуноглобулинов и их экспрессия. У пре-В-клеток нет поверхностных иммуноглобулинов; их появление означает переход к стадии В-клеток. Таким образом, клональное разнообразие возникает среди пре-В-клеток, не имеющих иммуноглобулиновых рецепторов, способных взаимо¬действовать с антигеном. Напротив, активация, пролиферация и дифференцировна В-клеток в плазматические клетки индуцируются контактом с антигеном и Т-хелперами или же поликлональными митогенами, полученными с пищей или внесенными в организм микробами. ...

la-молекулы — это генетически полиморфные гликопротеины, выполняю-щие роль узнающих элементов при взаимодействии В- и Т-клеток с антиген-презентирующими клетками. Незрелые В-клетки фенотипа IgM+ из печени, костного мозга или селезенки новорожденных мышей не экспрессируют 1а в заметных количествах [54]. Доля ^М+-клеток, экспрессирующих 1а, увели-чивается после рождения [49]; у 90% В-клеток мышей двухнедельного возраста на поверхности имеется заметное количество 1а. Такая последовательность событий подтверждается результатами введения новорожденным мышам анти-тел к мембранным антигенам. Если введение антител к IgM препятствует появ-лению всех типов ^М+-клеток [50], то введение антител к IgD подавляет образо-вание 1а+- и 1дО+-клеток, но не В-клеток с фенотипом IgM+, Ia~ или IgD~ [51]. Аналогично введение новорожденным мышам антител к 1а подавляет образова-ние 1а+-клеток и большинства,но не всех IgD+-n ^М+-клеток [51]. Хотя разви¬тие В-клеток у человека и мыши протекает в целом сходно, одн ...

Термин пре-В-клетки относится к предшественникам В-лимфоцитов и объе-диняет несколько типов клеток, расположенных в эмбриональной печени и костном мозге (рис. 3.3). Наименее зрелые пре-В-клетки не синтезируют ни тя-желых, ни легких цепей иммуноглобулинов [29], хотя они имеют по крайней мере один поверхностный антигенный маркер, общий с более зрелыми пре-В-клетками и В-лимфоцитами [30]. Большие, не содержащие иммуноглобулинов пре-В-клетки делятся, образуя большие пре-В-клетки, в цитоплазме которых имеются тяжелые цепи иммуноглобулинов класса ц. [24, 29]. Большие пре-В-клетки с фенотипом fi+ в свою очередь делятся, образуя малые пре-В-клетки, также содержащие в цитоплазме fx-цепи. Постмитотические пре-В-клетки затем приобретают способность к синтезу легких цепей [31, 32], что служит призна¬ком их превращения в малые незрелые В-клетки с расположенными на мембра¬не молекулами иммуноглобулинов. Хотя известно, что пре-В-клетки проходят несколько циклов деления, степень клональной экспансии н ...

Птицы
В-клетки образуются из стволовых клеток-предшественников, которые по кровеносным сосудам попадают в имеющуюся у птиц фабрициеву сумку [17]. Она представляет собой мешковидный орган, образующийся в раннем эмбриогенезе как дорсальное впячивание заднего отдела кишечника. Стволовые клетки проникают в мезенхимную ткань сумки куриного эмбриона начинаяс восьмого дня развития [18]. (Цыплята вылупляются через 20 дней после на-чала инкубирования.) Попав в мезенхиму фабрициевой сумки, часть стволовых клеток дифференцируется по эритроидному и миелоидному путям. Остальные клетки-предшественники из мезенхимы мигрируют в эпителий, выстилающий полость сумки. Их можно обнаружить рассеянными по эпителию на десятый день развития. Эти клетки размножаются и дифференцируются, образуя в эпи-телии колонии В-клеток. Формирующиеся в сумке лимфоциты синтезируют тя-желые цепи иммуноглобулинов класса i и легкие цепи, образуя тем самым мо-лекулы антител с изотипом IgM (см. гл. 7). Антитела можно обнар ...

Клетки селезенки новорожденных мышей не способны отвечать на многие полисахариды и родственные антигены, индуцирующие сильный иммунный от¬вет у клеток селезенки взрослых мышей [68]. Эти антигены, называемые анти¬генами типа II, обычно представляют собой растворимые полисахариды и конъю-гаты полисахаридов с гаптенами. Такие молекулы не вызывают поликлональ-ной активации клеток, и для индукции ими иммунного ответа не требуется уча¬стия антиген-специфических Т-клеток.

Вторая группа антигенов — антигены типа I — вызывают образование антител клетками селезенки как взрослых, так и новорожденных животных. Эти антигены способны индуцировать поликлональную активацию В-клеток. Как и антигены типа II, они вызывают сильный иммунный ответ у наследствен¬но бестимусных мышей (пи/пи). В-клетки взрослых нормальных мышей и мы¬шей, несущих ген xid, различаются по способности реагировать на антигены типов I и II: В-клетки xid-мышей, как и В-клетки нормальных новорожденных мышей, отвечают на ...